যুগান্তকারী সম্ভাব্য গবেষণা: পিসিআর-ভিত্তিক রক্তের সিটিডিএনএ মিথাইলেশন প্রযুক্তি কোলোরেক্টাল ক্যান্সারের জন্য এমআরডি নজরদারির একটি নতুন যুগের সূচনা করে

সম্প্রতি, JAMA অনকোলজি (IF 33.012) KUNYUAN BIOLOGY এর সহযোগিতায় ফুদান বিশ্ববিদ্যালয়ের ক্যান্সার হাসপাতালের অধ্যাপক কাই গুও-রিং এবং সাংহাই জিয়াও টং ইউনিভার্সিটি স্কুল অফ মেডিসিনের রেঞ্জি হাসপাতালের অধ্যাপক ওয়াং জিংয়ের একটি গুরুত্বপূর্ণ গবেষণা ফলাফল [1] প্রকাশ করেছে: "আর্লি ডিটেকশন অফ মলিকুলার রেসিডুয়াল ডিজিজ অ্যান্ড রিস্ক স্ট্র্যাটিফিকেশন ফর স্টেজ I থেকে III কোলোরেক্টাল ক্যান্সার ভায়া সার্কুলেটিং টিউমার DNA মিথাইলেশন অ্যান্ড রিস্ক স্ট্র্যাটিফিকেশন)"। এই গবেষণাটি বিশ্বের প্রথম মাল্টিসেন্টার গবেষণা যা কোলোরেক্টাল ক্যান্সার পুনরাবৃত্তি পূর্বাভাস এবং পুনরাবৃত্তি পর্যবেক্ষণের জন্য PCR-ভিত্তিক রক্ত ​​ctDNA মাল্টিজিন মিথাইলেশন প্রযুক্তি প্রয়োগ করে, বিদ্যমান MRD সনাক্তকরণ প্রযুক্তি পদ্ধতির তুলনায় আরও সাশ্রয়ী প্রযুক্তিগত পথ এবং সমাধান প্রদান করে, যা কোলোরেক্টাল ক্যান্সার পুনরাবৃত্তি পূর্বাভাস এবং পর্যবেক্ষণের ক্লিনিকাল ব্যবহারকে ব্যাপকভাবে উন্নত করবে বলে আশা করা হচ্ছে এবং রোগীর বেঁচে থাকা এবং জীবনের মান উল্লেখযোগ্যভাবে উন্নত করবে বলে আশা করা হচ্ছে। এই গবেষণাটি জার্নাল এবং এর সম্পাদকদের দ্বারাও অত্যন্ত মূল্যায়ন করা হয়েছিল এবং এই সংখ্যায় এটি একটি গুরুত্বপূর্ণ সুপারিশপত্র হিসেবে তালিকাভুক্ত হয়েছিল এবং স্পেনের অধ্যাপক জুয়ান রুইজ-বানোব্রে এবং মার্কিন যুক্তরাষ্ট্রের অধ্যাপক অজয় ​​গোয়েলকে এটি পর্যালোচনা করার জন্য আমন্ত্রণ জানানো হয়েছিল। মার্কিন যুক্তরাষ্ট্রের একটি শীর্ষস্থানীয় বায়োমেডিকেল মিডিয়া জিনোমওয়েবও এই গবেষণাটি রিপোর্ট করেছে।

কোলোরেক্টাল ক্যান্সার (CRC) চীনে গ্যাস্ট্রোইনটেস্টাইনাল ট্র্যাক্টের একটি সাধারণ ম্যালিগন্যান্ট টিউমার। ২০২০ সালের ইন্টারন্যাশনাল এজেন্সি ফর রিসার্চ অন ক্যান্সার (IARC) এর তথ্য অনুসারে, চীনে ৫৫৫,০০০ নতুন কেস বিশ্বের প্রায় এক-তৃতীয়াংশ, যার ফলে চীনে সাধারণ ক্যান্সারের সংখ্যার মধ্যে ঘটনা হার দ্বিতীয় স্থানে পৌঁছেছে; ২৮৬,০০০ মৃত্যু বিশ্বের প্রায় এক-তৃতীয়াংশ, যা চীনে ক্যান্সারের মৃত্যুর পঞ্চম সবচেয়ে সাধারণ কারণ হিসাবে স্থান পেয়েছে। চীনে মৃত্যুর পঞ্চম কারণ। এটি উল্লেখযোগ্য যে নির্ণয় করা রোগীদের মধ্যে, TNM পর্যায় I, II, III এবং IV যথাক্রমে ১৮.৬%, ৪২.৫%, ৩০.৭% এবং ৮.২%। ৮০% এরও বেশি রোগী মধ্যম এবং শেষ পর্যায়ে রয়েছে এবং তাদের মধ্যে ৪৪% রোগীর লিভার এবং ফুসফুসে একযোগে বা হেটেরোক্রোনিক দূরবর্তী মেটাস্টেস রয়েছে, যা বেঁচে থাকার সময়কালকে গুরুতরভাবে প্রভাবিত করে, আমাদের বাসিন্দাদের স্বাস্থ্যকে বিপন্ন করে এবং ভারী সামাজিক ও অর্থনৈতিক বোঝা সৃষ্টি করে। জাতীয় ক্যান্সার কেন্দ্রের পরিসংখ্যান অনুসারে, চীনে কোলোরেক্টাল ক্যান্সারের চিকিৎসার খরচের গড় বার্ষিক বৃদ্ধি প্রায় ৬.৯% থেকে ৯.২%, এবং রোগ নির্ণয়ের এক বছরের মধ্যে রোগীদের ব্যক্তিগত স্বাস্থ্য ব্যয় পারিবারিক আয়ের ৬০% দখল করতে পারে। ক্যান্সার রোগীরা এই রোগে ভুগছেন এবং প্রচণ্ড অর্থনৈতিক চাপের মধ্যেও রয়েছেন [2]।
নব্বই শতাংশ কোলোরেক্টাল ক্যান্সারের ক্ষত অস্ত্রোপচারের মাধ্যমে অপসারণ করা যেতে পারে, এবং যত তাড়াতাড়ি টিউমার সনাক্ত করা যায়, র‌্যাডিকাল সার্জিক্যাল রিসেকশনের পরে পাঁচ বছরের বেঁচে থাকার হার তত বেশি, তবে র‌্যাডিকাল রিসেকশনের পরে সামগ্রিক পুনরাবৃত্তির হার এখনও প্রায় 30%। চীনা জনসংখ্যার মধ্যে কোলোরেক্টাল ক্যান্সারের পাঁচ বছরের বেঁচে থাকার হার যথাক্রমে I, II, III এবং IV পর্যায়ে যথাক্রমে 90.1%, 72.6%, 53.8% এবং 10.4%।
র‍্যাডিকাল চিকিৎসার পর টিউমার পুনরাবৃত্তির একটি প্রধান কারণ হল ন্যূনতম অবশিষ্ট রোগ (MRD)। সাম্প্রতিক বছরগুলিতে, কঠিন টিউমারের জন্য MRD সনাক্তকরণ প্রযুক্তি দ্রুত উন্নত হয়েছে, এবং বেশ কয়েকটি ভারী পর্যবেক্ষণমূলক এবং হস্তক্ষেপমূলক গবেষণায় নিশ্চিত করা হয়েছে যে অস্ত্রোপচারের পরে MRD অবস্থা কোলোরেক্টাল ক্যান্সারের পুনরাবৃত্তির ঝুঁকি নির্দেশ করতে পারে। ctDNA পরীক্ষার সুবিধাগুলি হল অ-আক্রমণাত্মক, সহজ, দ্রুত, উচ্চ নমুনা অ্যাক্সেসযোগ্যতা সহ এবং টিউমারের বৈচিত্র্য কাটিয়ে ওঠা।
কোলন ক্যান্সারের জন্য মার্কিন NCCN নির্দেশিকা এবং কোলোরেক্টাল ক্যান্সারের জন্য চীনা CSCO নির্দেশিকা উভয়ই বলে যে কোলন ক্যান্সারে অস্ত্রোপচার পরবর্তী পুনরাবৃত্তি ঝুঁকি নির্ধারণ এবং সহায়ক কেমোথেরাপি নির্বাচনের জন্য, ctDNA পরীক্ষা দ্বিতীয় বা তৃতীয় পর্যায়ের কোলন ক্যান্সারের রোগীদের জন্য সহায়ক চিকিৎসার সিদ্ধান্তে সহায়তা করার জন্য ভবিষ্যদ্বাণীমূলক এবং ভবিষ্যদ্বাণীমূলক তথ্য প্রদান করতে পারে। যাইহোক, বেশিরভাগ বিদ্যমান গবেষণা উচ্চ-থ্রুপুট সিকোয়েন্সিং প্রযুক্তি (NGS) এর উপর ভিত্তি করে ctDNA মিউটেশনের উপর দৃষ্টি নিবদ্ধ করে, যার একটি জটিল প্রক্রিয়া, দীর্ঘ সময় এবং উচ্চ ব্যয় রয়েছে [3], সাধারণীকরণের সামান্য অভাব এবং ক্যান্সার রোগীদের মধ্যে কম প্রকোপ রয়েছে।
তৃতীয় পর্যায়ের কোলোরেক্টাল ক্যান্সারের রোগীদের ক্ষেত্রে, NGS-ভিত্তিক ctDNA ডায়নামিক পর্যবেক্ষণের জন্য একবার পরিদর্শনের জন্য $10,000 পর্যন্ত খরচ হয় এবং দুই সপ্তাহ পর্যন্ত অপেক্ষা করতে হয়। এই গবেষণায়, ColonAiQ®-এর মাল্টিজিন মিথাইলেশন পরীক্ষার মাধ্যমে, রোগীরা খরচের দশমাংশে ডায়নামিক ctDNA পর্যবেক্ষণ করতে পারবেন এবং মাত্র দুই দিনের মধ্যে একটি রিপোর্ট পেতে পারবেন।
প্রতি বছর চীনে কোলোরেক্টাল ক্যান্সারের ৫,৬০,০০০ নতুন কেস অনুসারে, প্রধানত দ্বিতীয়-তৃতীয় পর্যায়ের কোলোরেক্টাল ক্যান্সারে আক্রান্ত ক্লিনিকাল রোগীদের (অনুপাত প্রায় ৭০%) গতিশীল পর্যবেক্ষণের জন্য আরও জরুরি চাহিদা থাকে, তারপরে কোলোরেক্টাল ক্যান্সারের এমআরডি গতিশীল পর্যবেক্ষণের বাজারের আকার প্রতি বছর লক্ষ লক্ষ মানুষের কাছে পৌঁছায়।
এটা দেখা যাচ্ছে যে গবেষণার ফলাফলের গুরুত্বপূর্ণ বৈজ্ঞানিক এবং ব্যবহারিক তাৎপর্য রয়েছে। বৃহৎ পরিসরে সম্ভাব্য ক্লিনিকাল গবেষণার মাধ্যমে, এটি নিশ্চিত করেছে যে পিসিআর-ভিত্তিক রক্তের সিটিডিএনএ মাল্টিজিন মিথাইলেশন প্রযুক্তি কোলোরেক্টাল ক্যান্সারের পুনরাবৃত্তি পূর্বাভাস এবং পুনরাবৃত্তি পর্যবেক্ষণের জন্য সংবেদনশীলতা, সময়োপযোগীতা এবং ব্যয়-কার্যকারিতা উভয়ই ব্যবহার করা যেতে পারে, যা আরও বেশি ক্যান্সার রোগীদের উপকারের জন্য নির্ভুল ওষুধকে আরও ভালভাবে সক্ষম করে। গবেষণাটি কোলোরেক্টাল ক্যান্সারের জন্য একটি মাল্টি-জিন মিথাইলেশন পরীক্ষা, কোলোরেক্টাল ক্যান্সারের জন্য একটি কেন্দ্রীয় ক্লিনিকাল গবেষণা দ্বারা নিশ্চিত করা হয়েছে।
২০২১ সালে গ্যাস্ট্রোইনটেস্টাইনাল রোগের ক্ষেত্রে শীর্ষ আন্তর্জাতিক জার্নাল গ্যাস্ট্রোএন্টেরোলজি (IF33.88) ফুদান বিশ্ববিদ্যালয়ের ঝংশান হাসপাতাল, ফুদান বিশ্ববিদ্যালয়ের ক্যান্সার হাসপাতাল এবং অন্যান্য প্রামাণিক চিকিৎসা প্রতিষ্ঠানের KUNYAN বায়োলজিক্যালের সাথে একত্রে বহুকেন্দ্রিক গবেষণার ফলাফল প্রকাশ করেছে, যা কোলোরেক্টাল ক্যান্সারের প্রাথমিক স্ক্রিনিং এবং প্রাথমিক রোগ নির্ণয়ে ColonAiQ® ChangAiQ® এর চমৎকার কর্মক্ষমতা নিশ্চিত করেছে এবং প্রাথমিকভাবে কোলোরেক্টাল ক্যান্সারের পূর্বাভাস পর্যবেক্ষণে সম্ভাব্য প্রয়োগের অন্বেষণ করেছে।

ঝুঁকি স্তরবিন্যাস, চিকিৎসার সিদ্ধান্ত গ্রহণ এবং পর্যায় I-III কোলোরেক্টাল ক্যান্সারের প্রাথমিক পুনরাবৃত্তি পর্যবেক্ষণে ctDNA মিথাইলেশনের ক্লিনিকাল প্রয়োগকে আরও বৈধ করার জন্য, গবেষণা দলটি পর্যায় I-III কোলোরেক্টাল ক্যান্সারে আক্রান্ত 299 জন রোগীকে অন্তর্ভুক্ত করেছিল যারা র‌্যাডিকাল সার্জারি করেছিলেন এবং অস্ত্রোপচারের এক সপ্তাহ আগে, অস্ত্রোপচারের এক মাসের মধ্যে এবং গতিশীল রক্ত ​​ctDNA পরীক্ষার জন্য পোস্টঅপারেটিভ অ্যাডজুভেন্ট থেরাপিতে প্রতিটি ফলো-আপ পয়েন্টে (তিন মাসের ব্যবধানে) রক্তের নমুনা সংগ্রহ করেছিলেন।
প্রথমত, দেখা গেছে যে ctDNA পরীক্ষা কোলোরেক্টাল ক্যান্সার রোগীদের ক্ষেত্রে অস্ত্রোপচারের আগে এবং পরে উভয় ক্ষেত্রেই পুনরাবৃত্তির ঝুঁকি পূর্বাভাস দিতে পারে। অস্ত্রোপচারের আগে ctDNA-পজিটিভ রোগীদের ক্ষেত্রে অস্ত্রোপচারের আগে ctDNA-নেগেটিভ রোগীদের তুলনায় পুনরাবৃত্তির সম্ভাবনা বেশি ছিল (22.0% > 4.7%)। অস্ত্রোপচারের আগে ctDNA পরীক্ষা এখনও পুনরাবৃত্তির ঝুঁকি পূর্বাভাস দেয়: র‍্যাডিকাল রিসেকশনের এক মাস পরেও, ctDNA-পজিটিভ রোগীদের পুনরাবৃত্তির সম্ভাবনা নেতিবাচক রোগীদের তুলনায় 17.5 গুণ বেশি ছিল; দলটি আরও দেখেছে যে ctDNA এবং CEA পরীক্ষার সম্মিলিত ফলাফল পুনরাবৃত্তি সনাক্তকরণে সামান্য উন্নতি করেছে (AUC=0.849), তবে পার্থক্যটি শুধুমাত্র ctDNA (AUC=0.839) পরীক্ষার তুলনায় উল্লেখযোগ্য ছিল না। পার্থক্যটি শুধুমাত্র ctDNA (AUC=0.839) এর তুলনায় উল্লেখযোগ্য ছিল না।
ঝুঁকির কারণগুলির সাথে মিলিত ক্লিনিকাল স্টেজিং বর্তমানে ক্যান্সার রোগীদের ঝুঁকি স্তরবিন্যাসের প্রধান ভিত্তি, এবং বর্তমান দৃষ্টান্তে, এখনও বিপুল সংখ্যক রোগীর পুনরাবৃত্তি ঘটে [4], এবং ক্লিনিকে অতিরিক্ত-চিকিৎসা এবং চিকিৎসাধীন সহাবস্থানের কারণে আরও উন্নত স্তরবিন্যাস সরঞ্জামের জরুরি প্রয়োজন। এর উপর ভিত্তি করে, দলটি ক্লিনিকাল পুনরাবৃত্তি ঝুঁকি মূল্যায়ন (উচ্চ ঝুঁকি (T4/N2) এবং কম ঝুঁকি (T1-3N1)) এবং সহায়ক চিকিৎসার সময়কাল (3/6 মাস) এর উপর ভিত্তি করে পর্যায় III কোলোরেক্টাল ক্যান্সারের রোগীদের বিভিন্ন উপগোষ্ঠীতে শ্রেণীবদ্ধ করেছে। বিশ্লেষণে দেখা গেছে যে ctDNA-পজিটিভ রোগীদের উচ্চ-ঝুঁকিপূর্ণ উপগোষ্ঠীর রোগীদের ছয় মাস সহায়ক থেরাপি পেলে তাদের পুনরাবৃত্তির হার কম ছিল; ctDNA-পজিটিভ রোগীদের কম ঝুঁকিপূর্ণ উপগোষ্ঠীতে, সহায়ক চিকিৎসা চক্র এবং রোগীর ফলাফলের মধ্যে কোনও উল্লেখযোগ্য পার্থক্য ছিল না; যেখানে ctDNA-নেগেটিভ রোগীদের ctDNA-পজিটিভ রোগীদের তুলনায় উল্লেখযোগ্যভাবে ভাল পূর্বাভাস এবং দীর্ঘতর পোস্টঅপারেটিভ পুনরাবৃত্তি-মুক্ত সময়কাল (RFS) ছিল; প্রথম ধাপ এবং দ্বিতীয় ধাপের কম ঝুঁকিপূর্ণ কোলোরেক্টাল ক্যান্সার। দুই বছরের মধ্যে সমস্ত সিটিডিএনএ-নেগেটিভ রোগীর পুনরাবৃত্তি ঘটেনি; তাই, ক্লিনিকাল বৈশিষ্ট্যগুলির সাথে সিটিডিএনএর একীকরণ ঝুঁকি স্তরবিন্যাসকে আরও উন্নত করবে এবং পুনরাবৃত্তির পূর্বাভাস আরও ভালভাবে দেবে বলে আশা করা হচ্ছে।

চিত্র ১. কোলোরেক্টাল ক্যান্সারের পুনরাবৃত্তির প্রাথমিক সনাক্তকরণের জন্য POM1 এ প্লাজমা ctDNA বিশ্লেষণ
ডায়নামিক সিটিডিএনএ পরীক্ষার আরও ফলাফল দেখায় যে, নির্দিষ্ট চিকিৎসার পরে (র‌্যাডিক্যাল সার্জারি + অ্যাডজুভেন্ট থেরাপির পরে) রোগ পুনরাবৃত্তি পর্যবেক্ষণ পর্যায়ে (চিত্র 3ACD) নেতিবাচক সিটিডিএনএ রোগীদের তুলনায় পজিটিভ ডায়নামিক সিটিডিএনএ পরীক্ষার রোগীদের মধ্যে পুনরাবৃত্তির ঝুঁকি উল্লেখযোগ্যভাবে বেশি ছিল, এবং সিটিডিএনএ ইমেজিংয়ের (চিত্র 3B) চেয়ে 20 মাস আগে পর্যন্ত টিউমার পুনরাবৃত্তি নির্দেশ করতে পারে, যা রোগের পুনরাবৃত্তির প্রাথমিক সনাক্তকরণ এবং সময়মত হস্তক্ষেপের সম্ভাবনা প্রদান করে।

চিত্র ২। কোলোরেক্টাল ক্যান্সারের পুনরাবৃত্তি সনাক্ত করার জন্য অনুদৈর্ঘ্য কোহর্টের উপর ভিত্তি করে ctDNA বিশ্লেষণ

"কোলোরেক্টাল ক্যান্সারের উপর প্রচুর সংখ্যক ট্রান্সলেশনাল মেডিসিন স্টাডিজ এই শৃঙ্খলার নেতৃত্ব দেয়, বিশেষ করে সিটিডিএনএ-ভিত্তিক এমআরডি পরীক্ষা পুনরাবৃত্তি ঝুঁকি স্তরবিন্যাস, চিকিৎসার সিদ্ধান্ত পরিচালনা এবং প্রাথমিক পুনরাবৃত্তি পর্যবেক্ষণ সক্ষম করে কোলোরেক্টাল ক্যান্সার রোগীদের অস্ত্রোপচার পরবর্তী ব্যবস্থাপনা উন্নত করার দুর্দান্ত সম্ভাবনা প্রদর্শন করে।"

মিউটেশন সনাক্তকরণের চেয়ে নতুন MRD মার্কার হিসেবে DNA মিথাইলেশন বেছে নেওয়ার সুবিধা হল, এতে টিউমার টিস্যুর সম্পূর্ণ জিনোম সিকোয়েন্সিং স্ক্রিনিংয়ের প্রয়োজন হয় না, এটি সরাসরি রক্ত ​​পরীক্ষার জন্য ব্যবহৃত হয় এবং স্বাভাবিক টিস্যু, সৌম্য রোগ এবং ক্লোনাল হেমাটোপয়েসিস থেকে উদ্ভূত সোমাটিক মিউটেশন সনাক্তকরণের কারণে মিথ্যা-ইতিবাচক ফলাফল এড়ানো যায়।
এই গবেষণা এবং অন্যান্য সম্পর্কিত গবেষণা নিশ্চিত করে যে ctDNA-ভিত্তিক MRD পরীক্ষা হল পর্যায় I-III কোলোরেক্টাল ক্যান্সারের পুনরাবৃত্তির জন্য সবচেয়ে গুরুত্বপূর্ণ স্বাধীন ঝুঁকির কারণ এবং এটি চিকিৎসার সিদ্ধান্তগুলি পরিচালনা করতে সাহায্য করতে পারে, যার মধ্যে রয়েছে সহায়ক থেরাপির "বৃদ্ধি" এবং "ডাউনগ্রেডিং"। পর্যায় I-III কোলোরেক্টাল ক্যান্সারের জন্য অস্ত্রোপচারের পরে পুনরাবৃত্তির জন্য MRD হল সবচেয়ে গুরুত্বপূর্ণ স্বাধীন ঝুঁকির কারণ।
এপিজেনেটিক্স (ডিএনএ মিথাইলেশন এবং ফ্র্যাগমেন্টোমিক্স) এবং জিনোমিক্স (আল্ট্রা-ডিপ টার্গেটেড সিকোয়েন্সিং বা পুরো জিনোম সিকোয়েন্সিং) এর উপর ভিত্তি করে বেশ কয়েকটি উদ্ভাবনী, অত্যন্ত সংবেদনশীল এবং নির্দিষ্ট পরীক্ষা-নিরীক্ষার মাধ্যমে এমআরডির ক্ষেত্র দ্রুত বিকশিত হচ্ছে। আমরা আশা করি যে ColonAiQ® বৃহৎ পরিসরে ক্লিনিকাল গবেষণা পরিচালনা করে চলেছে এবং এমআরডি পরীক্ষার একটি নতুন সূচক হয়ে উঠতে পারে যা অ্যাক্সেসযোগ্যতা, উচ্চ কর্মক্ষমতা এবং সাশ্রয়ী মূল্যের সমন্বয় করে এবং নিয়মিত ক্লিনিকাল অনুশীলনে ব্যাপকভাবে ব্যবহার করা যেতে পারে।"
তথ্যসূত্র
[1] মো এস, ইয়ে এল, ওয়াং ডি, হান এল, ঝো এস, ওয়াং এইচ, দাই ডব্লিউ, ওয়াং ওয়াই, লুও ডব্লিউ, ওয়াং আর, জু ওয়াই, কাই এস, লিউ আর, ওয়াং জেড, কাই জি। টিউমার ডিএনএ মিথাইলেশনের মাধ্যমে পর্যায় I থেকে III কোলোরেক্টাল ক্যান্সারের জন্য আণবিক অবশিষ্ট রোগের প্রাথমিক সনাক্তকরণ এবং ঝুঁকি স্তরবিন্যাস। JAMA অনকোল। 2023 এপ্রিল 20।
[2] “চীনা জনসংখ্যার মধ্যে কোলোরেক্টাল ক্যান্সার রোগের বোঝা: সাম্প্রতিক বছরগুলিতে কি এটি পরিবর্তিত হয়েছে?”, চাইনিজ জার্নাল অফ এপিডেমিওলজি, খণ্ড ৪১, নং ১০, অক্টোবর ২০২০।
[3] Tarazona N, Gimeno-Valiente F, Gambardella V, et al. স্থানীয় কোলন ক্যান্সারে ন্যূনতম অবশিষ্ট রোগ ট্র্যাক করার জন্য সঞ্চালন-টিউমার ডিএনএর পরবর্তী প্রজন্মের সিকোয়েন্সিং লক্ষ্য করে। Ann Oncol. Nov 1, 2019;30(11):1804-1812।
[4] তাইয়েব জে, আন্দ্রে টি, অকলিন ই। নন-মেটাস্ট্যাটিক কোলন ক্যান্সারের জন্য রিফাইনিং অ্যাডজুভেন্ট থেরাপি, নতুন মান এবং দৃষ্টিভঙ্গি। ক্যান্সার ট্রিট রেভ. 2019;75:1-11।